AEG-1促进肝癌生长与定向肺转移的作用与机制研究（三）
2.2 AEG-1调控肝癌细胞的生长
裸鼠皮下移植瘤模型，皮下接种SMMC-7721-AEG-1-L和 SMMC-7721-control-L细胞2d内接种部位皮丘完全消失,3~5d接种部位见突出于皮肤表面的实性瘤结节,成瘤率为100%(图2A、2B)。肿瘤体积测量显示,SMMC-7721-AEG-1-L组肿瘤体积大且生长迅速，在第10天出现生长高峰，SMMC-7721-control-L瘤体小且生长速度缓慢，组中有1肿瘤体积明显较小,注射肝癌细胞10d后瘤块消失,至第20天再次出现。造成这一现象的原因可能与肝癌细胞皮下注射部位缺少血供,以及裸鼠本身免疫功能未完全敲除有关。SMMC-7721-shAEG-1-P和 SMMC-7721-control-P细胞2d内接种部位皮丘完全消失，第5天接种部位见突出于皮肤表面的实性瘤结节，成瘤率为100%(图2C、2D)。在第25天和第30天的测量中，SMMC-7721-AEG-1-L组肿瘤体积均显著高于SMMC-7721-control-L组(均P<0.05，图3A)。而SMMC-7721-shAEG-1-P组、SMMC-7721-control-P组裸鼠肿瘤体积在6次测量中均无显著差异(均P>0.05，图3B)。30d后部分体积较大的肿瘤侵袭皮肤出现破溃。
2.3 AEG-1与肝癌细胞肝内转移
处死皮下移植瘤裸鼠，取出肝脏组织肉眼进行观察，SMMC-7721-AEG-1-L组肝脏表面密布破溃出血点，SMMC-7721-control-L组未见异常。SMMC-7721-shAEG-1-P组以及SMMC-7721-control-P组肝脏均有转移灶(图4)。随机取一处肝脏组织做石蜡包埋，HE染色组织学检查发现:SMMC-7721-AEG-1-L组裸鼠肝脏组织出现弥漫性侵犯转移灶，SMMC-7721-control-L组见小范围炎症出现。SMMC-7721-shAEG-1-P与SMMC-7721-control-P组肝脏亦可见侵袭转移灶(图5)。肝内原位移植术后7d进行裸鼠活体成像证实手术移植成功率为100%。第35天再次进行裸鼠活体成像，结果显示:与SMMC-7721-control-L组相比，SMMC-7721-AEG-1-L组出现明显肝内侵袭转移，发光面
积和强度均显著增加;SMMC-7721-shAEG-1-P组肿瘤发光面积较小且发光强度明显降低，色阶比对小于SMMC-7721-control-P组的10%~20%(图6)。术后35天处死肝内原位移植瘤模型裸鼠，各组随机选择一只裸鼠取肝脏，进行石蜡包埋，光学显微镜组织学检测肝内包埋瘤体长径和转移灶数量:SMMC-7721-AEG-1-L组447.58μm,转移灶数量为11个,SMMC-7721-control-L组451.58μm,肝内转移灶数量为9个;SMMC-7721-shAEG-1-P组69.98μm,转移灶为6个;SMMC-7721-control-P组391.41μm,转移灶为9个。组间比较显示,SMMC-7721-AEG-1-L组和 SMMC-7721-control-L组存在显著差异;SMMC-7721-shAEG-1-P组的肿瘤大小及转移灶数量明显低于SMMC-7721-control-P组,见图7。
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